Cplt2.3 : Chromatographie sur couche mince

Présentation

La chromatographie sur couche mince est une technique de séparation et d'identification d'espèces chimique par comparaison.

Préparation

Préparation de la plaque à chromatographie

À 1 cm du bas de la plaque, tracer un trait horizontal au crayon de bois.

À l’aide de micropipettes, déposer une goutte de l'échantillon à étudier et une goutte des différents échantillons de référence sur le trait horizontal en les espaçant (bien repérer la nature de chaque dépôt, par exemple par une lettre sous chaque dépôt).

Préparation de la cuve à chromatographie

Dans une cuve à chromatographie, verser l’éluant jusqu’à ce que la hauteur du liquide soit de 0.5 cm.

Mise en œuvre de la chromatographie

Elution

Placer la plaque à chromatographie dans la cuve et mettre le couvercle.

Attendre que l’élution se poursuive.

Quand l’éluant arrive à environ 1 cm du haut de la plaque, retirer la plaque de la cuve. Tracer un trait horizontal au crayon de bois au niveau atteint par l’éluant.

Laisser sécher la plaque à chromatographie.

Révélation (nécessaire si les espèces chimiques sont incolores)

Révélation aux U.V.

Placer la plaque sous une lampe à ultraviolets. À l’aide d’un crayon de bois, entourer les taches.

Révélation par une solution de permanganate de potassium

Plonger la plaque dans une solution de permanganate de potassium.

Au bout de 10 s, sortir la plaque et la placer sur du papier absorbant pour la sécher.

À l’aide d’un crayon de bois, entourer les taches.

Exploitation du chromatogramme obtenu

- Analyse verticale : le nombre d'espèces chimiques présentes dans un échantillon est égal au nombre de taches à la verticale du dépôt

- Analyse horizontale : deux taches à la même hauteur correspondent à des espèces chimiques identiques.